Anime merupakan salah satu bentuk film yang sering kali dianggap hiburan, dapat menjadi sebuah media untuk menyampaikan pesan dan nilai budaya kepada khalayak luas. Anime mampu merepresentasikan beragam simbol, konflik, hingga nilai kemanusiaan. Salah satu anime yang dapat merepresentasikan kemanusiaan adalah anime Golden Kamuy. Berlatar masa pasca perang Jepang-Rusia, anime ini tidak hanya menyajikan cerita mengenai pencarian harta, tetapi juga menampilkan representasi kemanusiaan. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana kemanusiaan direpresentasikan di dalam anime Golden Kamuy. Pendekatan yang digunakan di dalam penelitian ini menggunakan metode kualitatif dengan analisis semiotika Roland Barthes. Dalam metode Barthes terdapat dua tingkatan, denotasi, konotasi dan mitos. Pengambilan data dari penelitian ini didapat dari observasi, observasi non partisipan dan observasi tidak terstruktur, juga dokumentasi yang didapat dari anime Golden Kamuy dengan mencatat narasi dan dialog, simbol dan ekspresi, yang memperlihatkan representasi kemanusiaan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa anime Golden Kamuy dapat merepresentasikan nilai kemanusiaan sesuai dengan analisis semiotika Roland Barthes melalui beberapa hal, seperti nilai kasih sayang dan belas kasih, keadilan, toleransi dan penghargaan keberagaman, ketulusan dan integritas, dan tolong menolong dan kemanusiaan.